酵母单杂交验证

服务简介：

   酵母单杂交技术是1993年由酵母双杂交技术发展而来的，其基本原理为：真核生物基因的转录起始需转录因子参与，转录因子通常由一个DNA特异性结合功能域和一个或多个其他调控蛋白相互作用的激活功能域组成，即DNA结合结构域(DNA—bindingdomain，BD)和转录激活结构域(activationdomain，AD)。用于酵母单杂交系统的酵母GAL4蛋白是一种典型的转录因子，GAL4的DNA结合结构域靠近羧基端，含有几个锌指结构，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位点(UAS)，而转录激活结构域可与RNA聚合酶或转录因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在这一过程中，DNA结合结构域和转录激活结构域可完全独立地发挥作用。据此，我们可将GAL4的DNA结合结构域置换为文库蛋白编码基因，只要其表达的蛋白能与目的基因相互作用，同样可通过转录激活结构域激活RNA聚合酶，启动下游报告基因的转录。

实验流程：

1.启动子生物信息学分析

2.实验方案的制定

3.诱饵与猎物载体的构建

4.诱饵载体转化酵母3-AT或AbA工作浓度的确定

5.共转化验证

6.展示图制作。

客户提供：

启动子序列、模板及转录因子模板。

交付内容：

1.原始数据、结果图片；

2.标准实验报告；

3.SCI标准Result Figure。

参考文献：

1，Sorbitol Modulates Resistance to Alternaria alternata by Regulating the Expression of an NLR Resistance Gene in Apple

2，The Coiled-Coil and Nucleotide Binding Domains of BROWN PLANTHOPPER RESISTANCE14 Function in Signaling and Resistance against Planthopper in Rice

3，Tracheophytes Contain Conserved Orthologs of a Basic Helix-Loop-Helix Transcription Factor That Modulate ROOT HAIR SPECIFIC Genes

4，TCP Transcription Factors Link the Regulation of Genes Encoding Mitochondrial Proteins with the Circadian Clock in Arabidopsis thaliana