|
服务简介: 荧光素酶互补图像检测是指当检测两种目标蛋白是否互作时,将荧光素酶分成N端(NLuc)片段2~416和C端(CLuc) 398~550两部分作为报告蛋白,将编码N端(NLuc)片段和C端(CLuc)片段的基因分别构建到不同的表达载体上得到N端载体和C端载体,在N端载体上N端(NLuc)片段的氨基端载入一种目标待检测蛋白的基因得N端检测载体,在C端载体上C端(CLuc)片段的羧基端载入另一种目标蛋白的基因得C端检测载体。将N端检测载体和C端检测载体的表产物混合在一起,目标蛋白下游两部分报告蛋白不会自发地装配起来,仅仅当与这两部分报告融合的目标蛋白之间可以互作时,两部分报告蛋白才能够正确地组装并产生活性,在加入发光底物后,可以通过特定仪器来检测其化学发光情况,如果发光情况判断两种目标蛋白之间是否存在互作。 服务流程: 1.构建表达质粒; 2.农杆菌转化及鉴定; 3.农杆菌混合共侵染烟草叶片; 4.动植物活体成像系统观察。 客户提供: 两个蛋白的基因序列及模板 交付内容: 1.原始数据、结果图片; 2.标准实验报告; 3.SCI标准Result Figure; 参考文献: 1,Luciferase Complementation Assay forProtein-Protein Interactions in Plants 2,MIR156-Targeted SPL9 Is Phosphorylated by SnRK2s and Interacts With ABI5 to Enhance ABA Responses in Arabidopsis 3,Abnormal expression of bHLH3 disrupts a flavonoid homeostasis network, causing differences in pigment composition among mulberry fruits |